配景先容
中医在疾病治疗方面已有两千多年的历史。。。。。。金复康由12种中草药组成,,,恒久用于肺癌的临床治疗。。。。。。已有研究批注,,,金复康可通过干预ROS介导的DNA损伤通路诱导循环肿瘤细胞(CTCs)的凋亡。。。。。。然而,,,金复康是否能抑制CTCs的转移及其机制尚不清晰。。。。。。
外泌体是一类巨细为30-150nm、呈茶托状的细胞外囊泡,,,普遍保存于细胞作育上清及种种体液中。。。。。。外泌体内含有多种卵白质(如TSG101、HSP70等)、核酸(DNA、RNA)和脂质(胆固醇、鞘磷脂等),,,这些内容物因释放外泌体的细胞差别而有较量大的差别。。。。。。
本文[1]作者通过对金复康处置惩罚组与未处置惩罚组的肿瘤外泌体举行卵白质组学剖析,,,发明金复康通过滋扰EGF信号通路抑制CTCs转移,,,从干预肿瘤外泌体的角度进一步探讨金复康抗肺癌转移的机制。。。。。。
本文课题思绪简述
文章效果
1. 金复康抑制循环肺肿瘤细胞(CTC-TJH-01)侵袭性伪足的形成和转移
作者通过免疫荧光染色、侵袭性伪足相关卵白(MMP14、cortactin、Tks5)表达检测及细胞的迁徙与侵袭实验,,,展现了金复康能抑制CTC-TJH-01细胞侵袭性伪足的形成和转移(Fig.1)。。。。。。

Fig.1 金复康抑制CTC-TJH-01细胞的转移
2. 循环肺肿瘤细胞释放的外泌体特征
作者通过超速离心疏散获得CTC-TJH-01细胞释放的外泌体,,,并通过纳米粒径跟踪剖析(NTA)、透射电镜(TEM)、western blot(WB)要领判断是否获得外泌体。。。。。。实验效果批注,,,作者已乐成获得CTC-TJH-01泉源的外泌体(Fig.2)。。。。。。

Fig.2 外泌体的提取和判断
3. 金复康处置惩罚对循环肺肿瘤细胞外泌体的卵白质组分影响
作者将实验样天职成两组,,,一组是用金复康处置惩罚CTC-TJH-01细胞后获得的外泌体,,,另一组是未用金复康处置惩罚CTC-TJH-01细胞获得的外泌体,,,随后将这两组外泌体样本举行卵白组剖析。。。。。。效果发明,,,有680种卵白是显著转变的,,,其中255种是上调的,,,425种是下调的。。。。。。亚细胞定位显示,,,上调卵白主要漫衍在细胞核、细胞质和胞外区域,,,下调卵白主要漫衍在细胞质和细胞核区域(Fig.3)。。。。。。

Fig.3 外泌体卵白的生物信息学剖析
4. 外泌体差别卵白的功效分类及通路剖析
从差别卵白的功效分类可以看出,,,这些卵白加入的最主要的生物历程是核糖体生物爆发和核卵白复合体生物爆发。。。。。。金复康处置惩罚后,,,EGF信号通路被显著抑制,,,GP6信号通路被显着激活。。。。。。其中EGF信号通路中mTOR、STAT3、STAT1和PRKCA卵白表达下调(Fig.4-5)。。。。。。
Fig.4 金复康干预后外泌体差别卵白的功效富集剖析

Fig.5 外泌体差别卵白的信号通路剖析
5. 金复康通过抑制EGF信号通路预防肺癌的转移
作者用WB检测了CTC-TJH-01细胞中的EGF、p-mTOR、p-STAT1、STAT3、p-STAT3、PRKCA、p-PRKCA、Akt1/2/3和p-Akt的卵白表达情形,,,效果发明,,,这些卵白的表达被显著抑制。。。。。。加了EGF后,,,金复康对CTC-TJH-01细胞迁徙的抑制作用可以逆转。。。。。。这些效果批注,,,金复康通过负调理EGF信号通路,,,抑制CTC-TJH-01细胞的转移(Fig.6)。。。。。。

Fig.6 金复康通过EGF信号通路抑制CTC细胞的迁徙
文章总结
本文作者通太过析循环肿瘤细胞渗透的外泌体卵白,,,通过卵白质组学手艺筛选金复康抗肺癌转移的潜在靶点。。。。。。不过本文仅从体外水平验证了金复康的抗转移功效,,,还缺乏体内实验的验证。。。。。。
参考文献:
[1] J Ethnopharmacol. 2020 Jun 28;256:112802. doi: 10.1016/j.jep.2020.112802. Epub 2020 Mar 30.
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