【热门】快看过来！外泌体可以从脑组织中疏散出来啦！
外泌体（Exosomes）作为细胞渗透到胞外的一种囊泡 ，，，，加入差别细胞间DNA、RNA、卵白质中分子的转达 ，，，，起到了细胞间的通讯作用。。。近些年 ，，，，许多学者都在探索外泌体在各个研究领域中饰演的角色和功效 ，，，，可是由于外泌体的不易获得性 ，，，，使得许多偏向的外泌体研究举步维艰。。。
在神经系统中 ，，，，由于脑脊液难以获得 ，，，，要想获得脑部直接泉源的外泌体则难度较大 ，，，，以是用脑组织疏散外泌体关于神经系统研究职员迫在眉睫。。。且现在外泌体的疏散要领许多只适用于疏散液体样本 ，，，，不太适合直接疏散组织。。。以是我们一直在起劲优化从脑组织中疏散外泌体的要领。。。
将脑组织剪成薄片 ，，，，放入离心管中加上消化液举行消化 ，，，，经水浴、重复轻轻上下倒置 ，，，，再用移液枪中止缓慢吹吸至消化竣事。。。随后加入作育基于消化液中 ，，，，混匀 ，，，，置于冰上。。。再举行一系列的差速超速离心历程 ，，，，包括除杂、滤膜过滤、超离等。。。最后用PBS重悬外泌体 ，，，，用重悬后的外泌体举行下面的透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分子（NTA）和marker WB判断。。。
将提取的外泌体样本置于冰盒中 ，，，，使用移液枪吸收外泌体样本于铜网上静置1min。。。(用镊子夹铜网要轻 ，，，，避免铜网夹破)。。。再将铜网上的外泌体样本吸干 ，，，，使用移液枪吸收醋酸双氧铀染色液室温染色。。。随后将染色完成的样本放于灯下烤。。。样本制好后 ，，，，视察照相 ，，，，生涯图片。。。效果如下：
从TEM效果中可以看出 ，，，，样本中有典范的外泌体结构 ，，，，且数目较量多 ，，，，巨细纷歧。。。
准备外泌体样本 ，，，，并将外泌体样本置于仪器中检测。。。检测效果如下：
从NTA效果中可以看出 ，，，，检测到的外泌体样本的颗粒巨细在30-150nm规模 ，，，，切合外泌体的巨细 ，，，，且颗粒浓度在2*10的11次方以上。。。
凭证实验室通例操作举行外泌体样本的WB实验。。。本次测试选择了三个卵白指标举行外泌体卵白判断 ，，，，划分为二阳一阴 ，，，，即CD9、TSG101和Calnexin。。。WB效果如下：
从WB效果可以看出 ，，，，CD9和TSG101在外泌体样本中泛起阳性效果 ，，，，Calnexin在外泌体样本中泛起阴性效果。。。切合外泌体的卵白特征。。。
从以上三种常用的外泌体判断效果中可得出 ，，，，本次使用的从小鼠脑组织中疏散外泌体的要领是可行的 ，，，，能顺遂获得需要的外泌体。。。可是要领中也保存一些缺乏 ，，，，从电镜效果中可以看出 ，，，，样本中可能尚有一些杂质掺杂 ，，，，若是要进一步除杂 ，，，，可能就要面临损失许多外泌体的危害 ，，，，以是经常遇到的问题是外泌体的纯度和含量很难二者兼得 ，，，，这是外泌体疏散现在一直保存的问题。。。
不止是脑组织 ，，，，诸如心肌组织、脊髓组织、骨骼肌组织等都可以经消化疏散出外泌体 ，，，，可是历程中用到的消化液以及实验历程也会有差别 ，，，，有待进一步优化和探索。。。也接待各人留言相助 ，，，，一起开发新要领！
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